دانشگاه علوم پزشکی ایران
Iran University of Medical Sciences

امکانات آموزشی و آزمایشگاهی

 | تاریخ ارسال: 1398/10/8 | 
تکنیک PCR  یا واکنش زنجیره ای پلیمراز (Polymerase Chain Reaction ) به منظور تکثیر یک قطعه DNA در سال ۱۹۸۴ توسط کری مولیس (Kary Mullis) ارائه شده است. این تکنیک تمامی مشکلات قبلی در زیست مولکولی که ناشی از عدم دسترسی به مقادیر زیاد از DNA یکسان بود را برطرف کرد و امروزه تقریباً در تمامی آزمایشگاههای زیست مولکولی جزو کارهای متداول بوده است. به دلیل همین کشف در سال ۱۹۹۳، جایزه نوبل به کری مولیس اهداء گردید.
PCR
همانند یک دستگاه فتوکپی عمل می کند که بوسیله آن می توان ژنوم هر موجود را به تعداد دلخواه و مشابه نسخه اصلی (البته در مواردی همراه با خطاهای جزئی) تکثیر نمود. با این روش می توان یک ژن را به اندازه ای تکثیر کرد تا بتوان با استفاده از روش‌هایی مانند الکتروفورز مشاهده کرد.
اساس این روش بسیار ساده بوده و مانند واکنش همانندسازی DNA در موجودات زنده توسط آنزیم DNA  پلیمراز صورت می گیرد. در موجودات زنده، مجموعه ای از چند پروتئین و آنزیم در فرآیند همانند سازی DNA نقش دارند در حالی که در واکنش PCR تنها نوع خاصی آنزیم DNA پلیمراز مقاوم به حرارت به نام Taq polymerase  به همراه بافر، کلرید منیزیم و نوکلئوتیدها استفاده می شود. در این تکنیک ابتدا پرایمراز DNA  موردنظر، طراحی می شود و بعدا با استفاده ازPCR ، هدف را تکثیر کرده و توسط الکتروفورز در مقابل یک کنترل می سنجند.

مواد لازم برای    PCR
 1- DNA الگو  (Template DNA)
2- پرایمرهای Forward و Reverse
3- دزوکسی نوکلئوتید تری فسفات (dNTPs)
4- Taq DNA polymerase
5- بافر
6- کاتیون های دو ظرفیتی(یون های منیزیم یا منگنز)

وسایل لازم برای PCR   
  1.  Work Station استریل برای مخلوط کردن مواد
  2. ترموسایکلر
  3. دستگاه و تانک الکتروفورز
  4. دستگاه ژل داکت
  5. ظروف مورد استفاده مانند ظروف شیشه ای، میکرو پیپت، سمپلر، سر سمپلر تیپ،  ویال
  6. یخچال- فریزر

دفعات مشاهده: 199 بار   |   دفعات چاپ: 49 بار   |   دفعات ارسال به دیگران: 0 بار   |   0 نظر